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粘液型铜绿假单胞菌检出及耐药

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[摘要]目的分析粘液型铜绿假单胞菌的临床分布及耐药性,为临床合理选择抗生素提供依据。方法对2014-2016年本院分离的粘液型铜绿假单胞菌临床分布及耐药性进行回顾分析。采用K-B纸片扩散法进行药敏试验。结果三年临床标本共分离出铜绿假单胞菌525株,其中粘液型铜绿假单胞菌84株,占16%;粘液型铜绿假单胞菌主要分离自临床呼吸内科;标本类型以痰为主,分离50株占59.52%。其次为烧伤科分离的分泌物14株占16.67%。粘液型铜绿假单胞菌对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星敏感率为100%;对派拉西林/他唑巴坦敏感率为〉98%;对头孢他啶、头孢吡肟、环丙沙星、左氧氟沙星的敏感率为95%-97%;对庆大霉素、氨曲南的敏感率为90%。未发现多药耐药菌株。结论粘液型铜绿假单胞菌对临床常用的10种抗生素虽有较高的敏感性,但临床医生应根据药敏结果并考虑细菌生物膜影响因素而合理选择抗生素。

[关键词]粘液型铜绿假单胞菌;耐药性;生物

膜铜绿假单胞菌属假单胞菌属,是一种需氧的革兰氏阴性杆菌。广泛分布于自然界中,近年来随着抗生素、激素及各类侵入性操作的大量应用,已成为临床重要的条件致病菌之一。同时是引起老年患者及免疫功能降低患者支气管扩张、慢性支气管炎、肺囊性纤维化等基础性疾病的重要病原菌。根据其菌落形态分为粘液型与非粘液型菌落两种,粘液型菌落是细菌为适应环境,有利于生存,在粘附于组织或其它物体表面时分泌的多糖基质---藻酸盐、纤维蛋白、脂蛋白等多糖蛋白复合物,使细菌相互粘连成膜状物,即细菌膜,又称生物膜[1]。生物膜的形成可有效的抵抗吞噬细胞的吞噬及抗菌药物的作用[2]。从而引起局部炎症的反复刺激,及膜表面细菌的不断释放,导致感染的反复发作难以治愈。给临床治疗带来很大的难度。因此,现对本院2014-2016年检测出的粘液型铜绿假单胞菌进行探讨,报告如下。

1材料与方法

1.1菌株来源

2014-2016年临床患者中共分离出铜绿假单胞菌525株,其中粘液型铜绿假单胞菌84株,剔除同一患者相同部位重复分离株。

1.2仪器与试剂

血平板、麦康凯平板、M-H琼脂培养基均购于安图生物,药敏纸片购于杭州滨和。

1.3细菌鉴定和药敏试验

按《全国临床检验操作规程》第4版进行操作。所培养的细菌用BDphoenixTm-100提供的阴性菌板条进行细菌鉴定。药敏试验采用K-B纸片扩散发,药物敏感性按照美国临床实验室标准(CLSI)2016版进行判定。质控菌株ATCC25922大肠埃希菌,ATCC27853铜绿假单胞菌。

1.4数据

采用WHONET5.6软件进行分析。

2结果

2.1粘液型铜绿假单胞菌的分布

临床共分离出铜绿假单胞菌525株,其中粘液型铜绿假单胞菌84株,占16%。痰标本分离最高50株,占59.52%。临床患者平均年龄≥60岁,临床科室以呼吸内科为主,标本类型以痰为主。

2.22014-2016年粘液型铜绿假单胞菌与非粘液型铜绿假单胞菌的耐药率。三年来,粘液型铜绿假单胞菌对临床10种抗生素的敏感率菌均高于90%,其中亚胺培南、美罗培南、阿米卡星敏感率为100%,未发现多药耐药菌株。非粘液型铜绿假单胞菌氨曲南的耐药率最高51.02%;其次庆大霉素耐药率41.95%;其它抗生素的耐药率均低于30%。

3讨论

铜绿假单胞菌广泛分布于自然界中,慢性感染病人由于抗生素、激素的大量使用使细菌移位可以引起内源性感染。各种侵入性的操作插管、导管等又可以引起外源性感染。同时也是导致细菌生物膜产生的高诱发因素之一。粘液型铜绿假单胞菌极易吸附于道管、粘膜表面形成生物膜。引起临床的难治性。[3]本报道显示,84株粘液型铜绿假单胞菌主要分离自临床呼吸内科、烧伤科分别为59.52%和16.67%。标本类型以痰标本为主,占59.52%。其次分离自烧伤科分泌物14株,占16.67%。本组84株粘液型铜绿假单胞菌感染患者中有48例患者病历资料有慢性支气管炎及肺囊性纤维化和慢性阻塞性肺气肿伴扩张等基础性疾病史,且患者平均年龄≥60岁以上。表明本地区粘液型铜绿假单胞菌引起感染的临床病人以老年患者慢性呼吸道感染为主。与文献[4]报道一致。可能与这些患者抵抗力差、长期使用抗生素、各种侵入性操作及疾病发展过程中的长期反复感染有关。故临床医生应加强有菌观念严格无菌操作的观点。同时有反复下呼吸道感染,尤其是老年患者和烧伤患者临床医生应及时合理的选择有效的抗生素。由于粘液型铜绿假单胞菌生物膜的存在,细菌生长缓慢。抗菌药物不能充分渗透到细菌体深部,所以24小时药敏结果易产生假敏感,因此本试验采用48小时判读结果。但无论是粘液型铜绿假单胞菌还是非粘液型铜绿假单胞菌,药敏试验只是测定了浮游细菌对抗生素的敏感性。并不能反应生物膜对抗生素的耐药性所起的作用。有研究表明粘液型铜绿假单胞菌在体外药敏试验时与存在于液体培养介质中浮游状态的铜绿假单胞菌相比,前者对抗生素有一种特殊的耐药,其耐药性可高达1000倍[5]。表2表明,非粘液型铜绿假单胞菌对头孢吡肟的耐药率略高于头孢头孢他啶,其可能机制是编码KPC与PSE-1的耐药基因存在和外排系统mexAB-OrM、mexCD-OprJ表达增加共同作用的结果[6]。

粘液型铜绿假单胞菌对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星的敏感率为100%;明显高于非粘液型铜绿假单胞菌。派拉西林/他唑吧坦、头孢他啶、头胞吡肟、左氧氟沙星等的敏感率均在90%以上。与吴娟等[3]报道一致。粘液型铜绿假单胞菌未检测出多药耐药菌株。表明本地区在由粘液型铜绿假单胞菌引起的感染时所选择抗生素种类范围比非粘液型铜绿假单胞菌更广,以上药物可作为经验性用药的首选药物。但临床由粘液型铜绿假单胞菌引起的感染根据药敏结果治疗效果很差,究其原因,粘液型铜绿假单胞菌能在体内产生厚厚的生物膜,阻止抗菌药物的进入;体外培养基不能代表体内复杂的生理环境,所以无法精确检测出药物在体内所产生的真实效果[7]。也有可能是是粘液型铜绿假单胞菌具有一定的粘稠性,调制菌悬液时浓度偏低。所以临床用药往往无效。因此,临床微生物室在检测出粘液型铜绿假单胞菌时有必要和临床医生沟通,考虑菌株产生生物膜的可能。临床选择抗生素时首选能破坏或抑制生物膜的药物。有研究表明,大环内酯类抗菌药物能有效减低生物被摸的抵抗作用,与体外敏感药物联合运用,能使敏感药物容易穿过被膜屏障接触到菌体,提高杀菌效果[8-9]。综上所述,铜绿假单胞菌的耐药机制非常复杂,由于抗生素及各种侵入性操作使粘液型铜绿假单胞菌的分离率不断增高,以呼吸内科慢性阻塞性肺病老年病人常见。同时由于生物膜的存在而试验结果并不能反应真实情况,因此,临床实验室分离出粘液型铜绿假单胞菌应通知临床医生并备注,以便临床医生合理的选择抗生素。

作者:杨琴;林青青;曾白华

安徽医药杂志责任编辑:张雨    阅读:人次
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